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絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液基礎(chǔ)上,添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是的混合物,其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`s F12 也包括非必須氨基酸,維生素的范圍亦很廣,另外常規(guī)含有無機鹽和代謝添加劑。MEM/F12 這兩種培養(yǎng)基各取1/2,形成神經(jīng)生物學(xué)zui通用的培養(yǎng)基。Dulbecco`s改良培養(yǎng)基――DMEM,現(xiàn)應(yīng)用于快速生長的細胞,同MEM含有相同的營養(yǎng)成分,但濃度高出2~4倍。選擇某種培養(yǎng)基,應(yīng)仔細了解成分表,應(yīng)知道大多數(shù)情形下培養(yǎng)基都有不足。例如,有些培養(yǎng)基在氨基酸中包括有,而這種培養(yǎng)基雖廣泛用于神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域,但它對某些對敏感的可能有細胞外毒性損傷的神經(jīng)元而言,則并非選擇,特別是如果神經(jīng)元生長在缺乏膠質(zhì)的環(huán)境中時。 F12中含有,據(jù)報道也有神經(jīng)毒效應(yīng)。
細胞在單純的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中不能存活,在特殊類型的淋巴細胞培養(yǎng)基中必須提供某些痕量營養(yǎng)物質(zhì)及生長因子才能使細胞得以生長并維持生長狀態(tài)?;A(chǔ)培養(yǎng)基常常要添加血清,血清終濃度多為5~20%。特殊用途的血清來源須用經(jīng)驗確定,廣泛應(yīng)用的血清種類有馬血清與胎牛血清。胎牛血清中富含有絲分裂因子,常選其作增殖細胞用的血清,也用于細胞系和原代培養(yǎng)。而馬血清常常用來作有絲分裂后的神經(jīng)元培養(yǎng)。然而,很多人也將胎牛血清用于神經(jīng)元培養(yǎng),也有人用馬血清來培養(yǎng)膠質(zhì)細胞。用大鼠進行神經(jīng)元培養(yǎng)的某些研究者喜歡使用同型血清;人類的胎盤血清,亦曾用于神經(jīng)組織的器官類型的培養(yǎng),也用在一些特殊培養(yǎng)種類中。
血清的不同批號含有不同的成分,所以許多人發(fā)現(xiàn),應(yīng)該在使用前對血清進行測試。大多數(shù)試劑商提供樣品,所滿意的批號即可選用,這樣可以一次得到足夠一年用量的血清,血清在使用前通常在56℃加熱30分鐘,這一過程稱為滅活。
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