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細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠下腔靜脈內(nèi)皮分離自下腔靜脈組織；下腔靜脈是體內(nèi)大的靜脈，收集下肢、盆部和腹部的靜脈血。下腔靜脈由左、右髂總靜脈匯合而成，匯合部位多在第5腰椎水平，少數(shù)平第4腰椎。下腔靜脈位于脊柱的右前方，沿腹主動(dòng)脈的右側(cè)上行，經(jīng)肝的腔靜脈溝、穿 膈的腔靜脈孔，開(kāi)口于右心房。下腔靜脈的前面有肝、胰頭、十二指腸水平部、右睪丸動(dòng)脈及小腸系膜根越過(guò)。后面為有膈腳、第1～4腰椎、有腰交感干和腹主動(dòng)脈的壁支。右側(cè)與 腰大肌、右腎、右腎上腺相鄰，左側(cè)為腹主動(dòng)脈。下腔靜脈的屬支有髂總靜脈、右睪丸靜脈、腎靜脈、右腎上腺靜脈、肝靜脈、膈下靜脈和腰靜脈，其中大部分 屬支與同名動(dòng)脈伴行。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠下腔靜脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠下腔靜脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： Big ET ELISA Kit

Porcine adiponectin (ADP) ELISA Kit 豬脂聯(lián)素(ADP)檢測(cè)試劑盒

ELISA 小鼠白蛋白(mouse Albumin)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforLN(HumanLaminin)ELISAKIT人層連蛋白/板層素

通用型DNA平滑末端連接克隆試劑盒10次

ELISAKitβ-lactamase雞β內(nèi)酰胺酶

COLEC10重組小鼠 COLEC10 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)

FASLG重組人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 Protein

CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白

ACVR1 Protein Canine 重組狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)

CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白

COLEC10重組小鼠 COLEC10 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

ACVR1 Protein Canine 重組狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

FASLG重組人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 Protein

小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human rheumatoid factor (RF) ELISA Kit 人類風(fēng)濕因子(RF)檢測(cè)試劑盒

Humancholyglycine,CGELISAKit 人甘膽酸(CG)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

associatedproteinA,SP-A檢測(cè)試劑盒大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

游離脂肪酸化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒50次

MouseiactParathormone,i-PTHELISAKit小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞小鼠合成酶檢測(cè)試劑盒   小鼠合成酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠合成酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠合成酶試劑盒、小鼠合成酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠胰淀素檢測(cè)試劑盒   小鼠胰淀素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠胰淀素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠胰淀素試劑盒、小鼠胰淀素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠抑制素檢測(cè)試劑盒   小鼠抑制素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠抑制素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抑制素試劑盒、小鼠抑制素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠增殖細(xì)胞核抗原檢測(cè)試劑盒   小鼠增殖細(xì)胞核抗原試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠增殖細(xì)胞核抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠增殖細(xì)胞核抗原試劑盒、小鼠增殖細(xì)胞核抗原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。