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細胞簡介：

小鼠淋巴結(jié)淋巴分離自淋巴結(jié)；淋巴結(jié)是哺乳類的周圍淋巴器官，由淋巴細胞集合而成。呈豆形，位于淋巴管行進途中，是產(chǎn)生免疫應答的重要器官之一。淋巴結(jié)表面包有被膜，被膜的結(jié)締組織伸入淋巴結(jié)內(nèi)形成小梁，構(gòu)成淋巴結(jié)的支架。被膜下為皮質(zhì)區(qū)，淋巴結(jié)的中心及門部為髓質(zhì)區(qū)。皮質(zhì)區(qū)有淋巴小結(jié)、彌散淋巴組織和皮質(zhì)淋巴竇（簡稱皮竇），髓質(zhì)包括由致密淋巴組織構(gòu)成的髓索和髓質(zhì)淋巴竇（簡稱髓竇）。淋巴竇的竇腔內(nèi)有許多淋巴細胞和巨噬細胞，從輸入淋巴管流來的淋巴液先進入皮竇再流向髓竇，后經(jīng)輸出淋巴管離開淋巴結(jié)。淋巴結(jié)的主要功能是濾過淋巴液，產(chǎn)生淋巴細胞和漿細胞，參與機體的免疫反應。淋巴結(jié)腫大或疼痛常表示其屬區(qū)范圍內(nèi)的器官有炎癥或其他病變。主要功能是濾過淋巴液，產(chǎn)生淋巴細胞和漿細胞，參與機體的免疫反應；當局部感染時，細菌、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入，引起局部淋巴結(jié)腫大。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們，則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉(zhuǎn)移。淋巴結(jié)淋巴細胞是白細胞的一種，由次級淋巴器官淋巴結(jié)產(chǎn)生，是機體免疫應答功能的重要細胞成分；細胞為圓形細胞核，細胞質(zhì)少。成熟淋巴細胞需依賴抗原刺激而分化增殖，繼而發(fā)揮其免疫功能。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠淋巴結(jié)淋巴采用分離淋巴結(jié)組織、研磨獲取單細胞懸液后通過密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為1×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的小鼠淋巴結(jié)淋巴經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 懸浮

細胞形態(tài) 圓形

傳代特性 不增殖；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠α1抗前體(pre-α1-AT)檢測試劑盒 ，英文名： pre-α1-AT ELISA Kit

Mouse protein phosphatase (PP) ELISA Kit 小鼠蛋酸酶(PP)檢測試劑盒

ELISA 小鼠血清淀粉樣蛋白(mouse SAA)  進口分裝

CLIAKitforIGFBP2(Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein2)ELISAKit人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2

通用型牛輪狀病毒(ROTO)試劑盒20次

ELISAKitCyclin-D2大鼠細胞周期素D2

HA重組甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9) 海葵神經(jīng)毒素(35肽)

IL22RA2重組人 IL22BP / IL22RA2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

CTF1 Protein Human 重組人 Cardiotrophin-1 / CTF1 蛋白

LAYN Protein Human 重組人 Layilin / LAYN 蛋白 (Fc 標簽)

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9) ?？窠?jīng)毒素(35肽)

CTF1 Protein Human 重組人 Cardiotrophin-1 / CTF1 蛋白

HA重組甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

LAYN Protein Human 重組人 Layilin / LAYN 蛋白 (Fc 標簽)

IL22RA2重組人 IL22BP / IL22RA2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat thyroglobulin (TG) ELISA Kit 大鼠甲狀腺球蛋白(TG)檢測試劑盒

HumanNeurokininsB,NKBELISAKit 人神經(jīng)B(NKB)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human3-Niotyrosine,3-檢測試劑盒人3-硝基酪(3-)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母總巰基含量比色法定量檢測試劑盒20次

Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠淋巴結(jié)淋巴細胞小鼠抗透明帶抗體(aZP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Qa淋巴細胞抗原2(Qa-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。